В чём разница ИФА и ПЦР?

Как быть если есть инфекция, пациентов много и нужно её найти за короткие сроки, но выжидать роста в питательной среде долго, в обычный микроскоп не увидеть и не у каждого найдётся в кармане электронный микроскоп? В таких ситуациях поиск ведётся другими путями среди которых есть ПЦР и ИФА.

1) ИФА (иммуноферментный анализ) - её суть заключается в поиске характерных следов какой либо инфекции (характерные белки или выработанные против инфекции антитела). По сути для исследования у человека берут кровь, хотя можно пробовать исследовать и другие био. материалы, в которых ожидаются следы инфекции, например в кале.
Как делают? Берут специальный планшет в который уже заложены белки (антигены) искомой инфекции и добавляется в него кровь пациента. Если инфекция у пациента есть, то значит в крови окажутся и специально выработанные иммунитетом антитела. Так вот, кровь содержащая в себе антитела к определенной инфекции попадая в такой планшет с белками этой же инфекции на неё обязательно среагирует т. е. её антитела приклеятся к белкам в планшете тем самым образовав так называемый - "белковый комплекс" (микрокомок). Потом, чтобы найти полученные белковые микрокомки в планшете, он промывается и в него добавляют уже меченые белки (антитела), которые приклеиваются к получившемуся ранее белковому комплексу, получается ещё больший такой микрокомок из белков, но он уже меченый. Затем снова планшет промывается и туда добавляют определённый субстрат, который при реакции с меченым белковым комплексом поменяет с ним окраску уже видимую невооруженным глазом. Если окраска не поменялась после добавления субстрата в планшет, то следов искомой инфекции нет ибо не с чем было крови реагировать на белки в планшете.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) - её суть заключается в поиске и изучении генетического материала инфекции после многократного его клонирования, ведь чем больше генетического материала мы клонируем, тем больше информации о нём узнаем.
Использоваться для этого может много разных видов био. материала пациента (кровь, слюна, кал, ткани и пр.).
Как делают? Берут маленькую чистую пробирку объёмом 0,2 мл и спец. шприцами учитывая последовательность действий, концентрацию и количество растворов делают в ней такой коктейль в котором и будет происходить вся эта цепная реакция клонирования ДНК-инфекции, туда добавляют много растворов: воду + буфер + MgCl2 + нуклеотид + праймеры всякие + полимераза. Затем получившаяся смесь распределяется по остальным пробиркам и в них добавляется био. материал пациента в котором таится вот эта самая ДНК искомой инфекции, которую следует найти и изучить.
Затем все эти пробирки помещаются в специальный прибор называемый амплификатором, включают его, настраивают заложенные программы выбирая температурные циклы с определёнными интервалами и их повторениями для того чтобы цепная реакция клонирования ДНК началась и проходила удачно.
Когда амплификатор закончит работу и в каждой пробирке теперь есть выращенные клоны ДНК-инфекции, то каждую из них теперь можно изучать методом секвенирования ДНК ломая их током (электрофорез) и вычислять и помечать в них генетические последовательности как коды характерные для той или иной инфекции, её вида, находя в них особенности к чему либо и т. д. Это целое искусство в молекулярной биологии, на атомарном уровне вычислять генетическую последовательность, сам геном инфекции.

Достоинством диагностики посредством ПЦР является тот факт, что лаборант может выявить и распознать даже одиночную ДНК в этом он и хороший. ПЦР отличный по своему он выявляет все инфекции находящиеся в латентной или хронической форме. ПЦР анализ обнаруживает возбудителя инфекционного процесса на стадии, когда еще нет симптомов. Достоверность ПЦР метода самая высокая — от 99 до 100%.

ИФА-анализ основан на выявлении не самой инфекции, а ее продуктов жизнедеятельности - белов-маркеров. ПЦР-анализ напротив выявляет существующие в настоящее время инфекционные агенты (бактерии, вирусы, грибы) .