Вам трудно перейти на "вы" если коллега стал вашим начальником?

Было и по другому: коллега была сначала начальником, но не лично моим, а, скорее мы были на равных, но начало было с" Вы", потом мы как то подружились, лет 15 работали в одной больнице, много выпито вместе(праздники), очень много перепето песен, уже 12 лет как я уволилась и уехала, но только "Вы", другое не выговаривается.

В официальной обстановке на "ВЫ", а наедине как обычно.

Нет, если в определённые моменты это требуется.

Отличный повод постебаться над ним

Скорее да, чем нет